El nitrogen és un gas àmpliament utilitzat en la fabricació, juntament amb una dotzena d’altres compostos inerts. No sempre és aconsellable transportar o emmagatzemar aquest gas en estat pur, i de vegades només cal determinar la seva presència en la substància. Per a això, s’utilitza el mètode Kjeldahl. El mètode Kjeldahl consisteix en el fet que el nitrogen, que es troba en el líquid filtrat sense proteïnes, es converteix en amoni durant la reacció de combustió amb àcid sulfúric. L’amoníac resultant s’allibera lliurement després d’una reacció alcalina.
Instruccions
Pas 1
Per a l’anàlisi, pren 4 ml de sang, plasma o sèrum, dilueix-lo amb 8 ml d’aigua destil·lada. Afegiu 8 ml d’àcid tricloroacètic al mateix matràs. Remeneu bé la solució i filtreu-la.
Pas 2
Al flascó de destil·lació, aboqueu 5 ml del líquid filtrat, que per defecte contindrà 1 ml de sang analitzada. Afegiu-hi 1 ml de reactiu núm. 2, escalfeu el matràs a flama baixa fins que aparegui vapor blanc.
Pas 3
Col·loqueu el matràs de manera que la seva part inferior toqui lleugerament les flames. El procés de combustió es considera complet quan el líquid es torna blavós o incolor.
Pas 4
Deixeu el matràs a refredar. Prou d’un minut i mig a dos minuts. En cas contrari, es forma un precipitat insoluble.
Pas 5
Aboqueu aigua per la paret i esbandiu-hi l'embut. Agiteu fins que es barregi, escalfant el matràs si cal.
Pas 6
Muntar el dispositiu, connectar el receptor. Introduïu 10 ml 0,01 N. al receptor. solució d’àcid sulfúric. Afegiu una o dues gotes de metilrot. Després de combinar tots els ingredients, fixeu la bomba de raig d’aigua al receptor.
Pas 7
Comenceu a passar aire per la preparació, aboqueu un 33% d'hidròxid de sodi a la part de destil·lació, fins que el líquid passi de incolor a blau fosc o marró fosc. Això indica una reacció alcalina.
Pas 8
Atureu la destil·lació al cap de deu minuts. Tanqueu l’aixeta de la bomba de raig d’aigua, obriu l’endoll del receptor i esbandiu l’àcid sulfúric des de l’extrem del tub de refrigeració. Substituïu-lo per un altre receptor amb el mateix volum de 0,01 N. solució d’àcid sulfúric, feu una segona destil·lació.
Pas 9
Afegiu sosa càustica al primer receptor fins a obtenir un color groc estable durant 30 segons.
Pas 10
Conclusió: 1 ml 0,01 N. l’àcid sulfúric o l’hidròxid de sodi correspon a 0,14 mg de nitrogen.
La diferència entre la quantitat d'àcid sulfúric col·locada al receptor i la quantitat d'hidròxid de sodi presa durant la valoració, produïda a 0,14 mg, és igual a la quantitat de nitrogen residual a la prova d'1 ml de sang. Per mostrar la quantitat de nitrogen en mil·ligrams per cent, el resultat s’ha de multiplicar per 100.
